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2023
8-116月29日,普諾賽就RAW264.7、SF9、NK-92這三個(gè)細(xì)胞進(jìn)行了一場(chǎng)直播分享,分別詳細(xì)講解了三株細(xì)胞的培養(yǎng)方法及需要注意的問題。直播回放可以點(diǎn)擊普諾賽公眾號(hào)菜單欄【資料中心】-【往期直播回放】查看學(xué)習(xí)。本期直播答疑,從直播間的提問中,篩選出其中有代表性的問題,逐一進(jìn)行解答。01問RAW264.7細(xì)胞如何傳代?用細(xì)胞刮刀對(duì)細(xì)胞有影響嗎?一定要吹下來嗎?吹不下來的是狀態(tài)不好的細(xì)胞嗎?RAW264.7細(xì)胞傳代方法:①培養(yǎng)基中的漂浮的細(xì)胞離心收集②輕拍培養(yǎng)瓶,將貼壁松散的細(xì)胞...
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8-1大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基是一種重要的細(xì)胞培養(yǎng)基,具有低pH值、營(yíng)養(yǎng)豐富、易于消化等特點(diǎn)。通過合理選擇和優(yōu)化培養(yǎng)基成分,可以進(jìn)一步促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化,為相關(guān)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供有力支持。1、兼容性:培養(yǎng)基應(yīng)與大鼠骨髓細(xì)胞具有良好的兼容性,以確保細(xì)胞在培養(yǎng)過程中能夠正常生長(zhǎng)和增殖。2、低pH值:培養(yǎng)基的pH值應(yīng)該保持在一定范圍內(nèi),以促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化。3、營(yíng)養(yǎng)豐富:培養(yǎng)基應(yīng)包含豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的需求。4、易于消化:培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子和刺激劑應(yīng)有助于促...
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7-31原代細(xì)胞具有貼壁特殊性,因此在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),常出現(xiàn)貼壁不牢的情況,因此我們需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被處理,以增強(qiáng)細(xì)胞的貼壁性。本期細(xì)胞學(xué)堂將為您詳述原代細(xì)胞培養(yǎng)中的包被操作步驟及注意事項(xiàng),讓您的實(shí)驗(yàn)順暢無阻!01常用包被試劑為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求,需要對(duì)培養(yǎng)器皿用不同的物質(zhì)包被后使用,包被條件常選用膠原蛋白Ⅰ(12μg/mL)、多聚賴氨酸PLL(0.1mg/mL)和明膠(0.1%)三種,依據(jù)細(xì)胞種類而定。NO、1膠原蛋白Ⅰ膠原蛋白...
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7-28平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)也叫生理溶液(PhysiologicalSolution),是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體的,具有維持滲透壓、保持PH穩(wěn)定以及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)的作用,可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、器官或細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。一些平衡鹽溶液中還添加了少量酚紅,用以指示溶液的酸堿度變化。是在做腸道檢查前,專門用來清腸用的藥物,所以普通藥店是沒有賣的。其主要成分為氯化鈉、氯化鉀和硫酸鎂等,在腸道局部產(chǎn)生高...
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7-28脾臟是機(jī)體重要的免疫器官之一,含有大量的淋巴細(xì)胞,占全身淋巴組織總量的25%,在小鼠中,由于小鼠血液量少,從外周血液中分離大量淋巴細(xì)胞較為困難,故經(jīng)常需要從其脾臟中獲取大量的淋巴細(xì)胞。不久前,來自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院的李老師在Biomaterials雜志上發(fā)布的文章中就用到了上述實(shí)驗(yàn)。以下為是李老師分享的一些相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。1操作步驟1材料準(zhǔn)備選取具有正常免疫功能的成年小鼠(所需的小鼠數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定,通常一只小鼠脾臟可提取的淋巴細(xì)胞數(shù)量為2~6×107),快速斷...
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7-21THP-1(人單核細(xì)胞白血?。┦且环N常見的白血病類型,主要發(fā)生在單核細(xì)胞系的惡性克隆增殖。該疾病常見于兒童和年輕成年人,其發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)各有特點(diǎn)。下面將對(duì)THP-1的病因、癥狀和治療方法進(jìn)行綜述,以增加對(duì)該疾病的了解和認(rèn)識(shí)。一、病因:THP-1的確切病因尚不全清楚,但某些因素與其發(fā)生相關(guān):1、遺傳因素:遺傳突變和染色體異??赡芘cTHP-1的發(fā)生有關(guān)。2、環(huán)境因素:暴露于某些致癌物質(zhì)或輻射可能增加THP-1的風(fēng)險(xiǎn)。二、癥狀:THP-1的癥狀因個(gè)體差異而異,以下為常見癥狀:1...
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7-1822RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系[1]。此細(xì)胞系表達(dá)前列腺特異抗原PSA。二羥基睪丸脂酮可輕微刺激細(xì)胞生長(zhǎng),經(jīng)WesternBlot檢測(cè)溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應(yīng)。EGF可刺激細(xì)胞生長(zhǎng),但TGFβ-1不能抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。該細(xì)胞在裸鼠中成瘤。近年來,研究表明22RV1產(chǎn)生高滴度的人類逆轉(zhuǎn)錄病毒XMRV(異嗜性小鼠白血病病毒相關(guān)病毒)。細(xì)胞特性形態(tài)上皮樣細(xì)胞單層貼壁生長(zhǎng)...
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7-17RAW264.7細(xì)胞是一種重要的小鼠巨噬細(xì)胞系,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)和炎癥研究領(lǐng)域。為了支持RAW264.7細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖,研究人員通常使用特定的細(xì)胞培養(yǎng)基。其中,RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)基是一種專門為這一細(xì)胞系設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有優(yōu)異的配方和特性。1、優(yōu)化的配方:采用經(jīng)過優(yōu)化的配方,提供了細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。它能夠滿足RAW264.7細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖需求,促進(jìn)細(xì)胞的健康和增殖。2、無血清配方:通常采用無血清配方,避免了傳統(tǒng)培養(yǎng)基中可能存在的血清引起的變異性和不確定性。...
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