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直播答疑 | 三大難養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)解析

6月29日，普諾賽就RAW264.7、SF9、NK-92這三個(gè)細(xì)胞進(jìn)行了一場(chǎng)直播分享，分別詳細(xì)講解了三株細(xì)胞的培養(yǎng)方法及需要注意的問題。直播回放可以點(diǎn)擊普諾賽公眾號(hào)菜單欄【資料中心】-【往期直播回放】查看學(xué)習(xí)。本期直播答疑，從直播間的提問中，篩選出其中有代表性的問題，逐一進(jìn)行解答。01問RAW264.7細(xì)胞如何傳代？用細(xì)胞刮刀對(duì)細(xì)胞有影響嗎？一定要吹下來嗎？吹不下來的是狀態(tài)不好的細(xì)胞嗎？RAW264.7細(xì)胞傳代方法：①培養(yǎng)基中的漂浮的細(xì)胞離心收集②輕拍培養(yǎng)瓶，將貼壁松散的細(xì)胞...

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你了解大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基嗎？

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基是一種重要的細(xì)胞培養(yǎng)基，具有低pH值、營(yíng)養(yǎng)豐富、易于消化等特點(diǎn)。通過合理選擇和優(yōu)化培養(yǎng)基成分，可以進(jìn)一步促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化，為相關(guān)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供有力支持。1、兼容性：培養(yǎng)基應(yīng)與大鼠骨髓細(xì)胞具有良好的兼容性，以確保細(xì)胞在培養(yǎng)過程中能夠正常生長(zhǎng)和增殖。2、低pH值：培養(yǎng)基的pH值應(yīng)該保持在一定范圍內(nèi)，以促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化。3、營(yíng)養(yǎng)豐富：培養(yǎng)基應(yīng)包含豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的需求。4、易于消化：培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子和刺激劑應(yīng)有助于促...

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細(xì)胞學(xué)堂｜原代細(xì)胞培養(yǎng)包被如何操作

原代細(xì)胞具有貼壁特殊性，因此在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，常出現(xiàn)貼壁不牢的情況，因此我們需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被處理，以增強(qiáng)細(xì)胞的貼壁性。本期細(xì)胞學(xué)堂將為您詳述原代細(xì)胞培養(yǎng)中的包被操作步驟及注意事項(xiàng)，讓您的實(shí)驗(yàn)順暢無阻！01常用包被試劑為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求，需要對(duì)培養(yǎng)器皿用不同的物質(zhì)包被后使用，包被條件常選用膠原蛋白Ⅰ（12μg/mL）、多聚賴氨酸PLL（0.1mg/mL）和明膠（0.1%）三種，依據(jù)細(xì)胞種類而定。NO、1膠原蛋白Ⅰ膠原蛋白...

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平衡鹽溶液的主要作用

平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)也叫生理溶液(PhysiologicalSolution)，是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體的，具有維持滲透壓、保持PH穩(wěn)定以及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)的作用，可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、器官或細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。一些平衡鹽溶液中還添加了少量酚紅，用以指示溶液的酸堿度變化。是在做腸道檢查前，專門用來清腸用的藥物，所以普通藥店是沒有賣的。其主要成分為氯化鈉、氯化鉀和硫酸鎂等，在腸道局部產(chǎn)生高...

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實(shí)戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細(xì)胞的提取和分選之經(jīng)驗(yàn)小結(jié)

脾臟是機(jī)體重要的免疫器官之一，含有大量的淋巴細(xì)胞，占全身淋巴組織總量的25%，在小鼠中，由于小鼠血液量少，從外周血液中分離大量淋巴細(xì)胞較為困難，故經(jīng)常需要從其脾臟中獲取大量的淋巴細(xì)胞。不久前，來自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院的李老師在Biomaterials雜志上發(fā)布的文章中就用到了上述實(shí)驗(yàn)。以下為是李老師分享的一些相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。1操作步驟1材料準(zhǔn)備選取具有正常免疫功能的成年小鼠（所需的小鼠數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定，通常一只小鼠脾臟可提取的淋巴細(xì)胞數(shù)量為2~6×107），快速斷...

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THP-1（人單核細(xì)胞白血?。翰∫颉Y狀和治療方法的綜述

THP-1（人單核細(xì)胞白血?。┦且环N常見的白血病類型，主要發(fā)生在單核細(xì)胞系的惡性克隆增殖。該疾病常見于兒童和年輕成年人，其發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)各有特點(diǎn)。下面將對(duì)THP-1的病因、癥狀和治療方法進(jìn)行綜述，以增加對(duì)該疾病的了解和認(rèn)識(shí)。一、病因：THP-1的確切病因尚不全清楚，但某些因素與其發(fā)生相關(guān)：1、遺傳因素：遺傳突變和染色體異?？赡芘cTHP-1的發(fā)生有關(guān)。2、環(huán)境因素：暴露于某些致癌物質(zhì)或輻射可能增加THP-1的風(fēng)險(xiǎn)。二、癥狀：THP-1的癥狀因個(gè)體差異而異，以下為常見癥狀：1...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 從傳代到換液，養(yǎng)好22RV1

22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系[1]。此細(xì)胞系表達(dá)前列腺特異抗原PSA。二羥基睪丸脂酮可輕微刺激細(xì)胞生長(zhǎng)，經(jīng)WesternBlot檢測(cè)溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應(yīng)。EGF可刺激細(xì)胞生長(zhǎng)，但TGFβ-1不能抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。該細(xì)胞在裸鼠中成瘤。近年來，研究表明22RV1產(chǎn)生高滴度的人類逆轉(zhuǎn)錄病毒XMRV(異嗜性小鼠白血病病毒相關(guān)病毒)。細(xì)胞特性形態(tài)上皮樣細(xì)胞單層貼壁生長(zhǎng)...

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RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)基：促進(jìn)免疫細(xì)胞研究的理想選擇

RAW264.7細(xì)胞是一種重要的小鼠巨噬細(xì)胞系，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)和炎癥研究領(lǐng)域。為了支持RAW264.7細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖，研究人員通常使用特定的細(xì)胞培養(yǎng)基。其中，RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)基是一種專門為這一細(xì)胞系設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，具有優(yōu)異的配方和特性。1、優(yōu)化的配方：采用經(jīng)過優(yōu)化的配方，提供了細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。它能夠滿足RAW264.7細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖需求，促進(jìn)細(xì)胞的健康和增殖。2、無血清配方：通常采用無血清配方，避免了傳統(tǒng)培養(yǎng)基中可能存在的血清引起的變異性和不確定性。...

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